二氧化碳培養(yǎng)箱使用前和期間遇到的困難

[2019/8/6]

二氧化碳培養(yǎng)箱使用前和期間遇到的困難

一、二氧化碳培養(yǎng)箱的選購(gòu)問題

二氧化碳培養(yǎng)箱主要控制模擬活體內(nèi)環(huán)境相關(guān)的3個(gè)基本變量：穩(wěn)定的二氧化碳水平、溫度、相對(duì)濕度。要有穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境，就要考慮這三方面的影響因素，選購(gòu)時(shí)，就應(yīng)該對(duì)這些“重中之重”有一定的了解才能選到適合自己的儀器。但是，其它的一些方面的“小”因素也不能忽略，因?yàn)檫@些都會(huì)影響儀器的使用價(jià)值和壽命。選購(gòu)時(shí)，就應(yīng)該從各方面的因素加以考慮。

1、二氧化碳因素：

二氧化碳濃度探測(cè)可通過兩種控制系統(tǒng)——紅外傳感器（IR）或熱傳導(dǎo)傳感器（TC）進(jìn)行測(cè)量。當(dāng)二氧化碳培養(yǎng)箱的門被打開時(shí)，CO2從箱體內(nèi)漏出，此時(shí)傳感器就會(huì)探測(cè)到CO2濃度的降低，并做出及時(shí)的反應(yīng)，重新注入CO2使其恢復(fù)到原先預(yù)設(shè)的水平。熱傳導(dǎo)傳感器（TC）監(jiān)控CO2濃度的工作原理是通過測(cè)量?jī)蓚€(gè)電熱調(diào)節(jié)器（一個(gè)調(diào)節(jié)器暴露于箱體環(huán)境內(nèi)，另一個(gè)則是封閉的）之間的電阻變化來(lái)實(shí)現(xiàn)的。箱內(nèi)CO2濃度的變化會(huì)改變兩個(gè)電熱調(diào)節(jié)器間的電阻，從而促使傳感器產(chǎn)生反應(yīng)以達(dá)到調(diào)節(jié)CO2水平的作用。TC控制系統(tǒng)的一個(gè)缺點(diǎn)就是箱內(nèi)溫度和相對(duì)濕度的改變會(huì)影響傳感器的精確度。當(dāng)箱門被頻繁打開時(shí)，不僅CO2濃度，溫度和相對(duì)濕度也會(huì)發(fā)生很大的波動(dòng)，因而影響了TC傳感器的精度。

2、相對(duì)濕度因素：

培養(yǎng)箱內(nèi)相對(duì)濕度的控制是非常重要的，維持足夠的濕度水平才能保證不會(huì)由于過度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。大型的二氧化碳培養(yǎng)箱是用蒸汽發(fā)生器或噴霧器來(lái)控制相對(duì)濕度水平的，而大多數(shù)中、小型培養(yǎng)箱則是通過濕度控制面板（humiditypans）的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的（其產(chǎn)生的相對(duì)濕度水平可達(dá)95-98％）。一些培養(yǎng)箱有一個(gè)能在加熱的控制面板上保持水份的濕度蓄水池（humidityreservoir），這樣可以增強(qiáng)蒸發(fā)作用，此蓄水池能增加相對(duì)濕度水平達(dá)97-98％。但是，這個(gè)系統(tǒng)也更復(fù)雜，由于復(fù)雜結(jié)構(gòu)的增加一些難以預(yù)料的問題也會(huì)在使用過程中出現(xiàn)。

3、溫度因素：

保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細(xì)胞健康生長(zhǎng)的重要因素。當(dāng)選購(gòu)二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí)，有兩種類型的加熱結(jié)構(gòu)可供選擇：氣套式加熱和水套式加熱。雖然這兩種加熱系統(tǒng)都是精確和可靠的，但是它們都有著各自的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。水套式培養(yǎng)箱是通過一個(gè)獨(dú)立的熱水間隔間包圍內(nèi)部的箱體來(lái)維持溫度恒定的。熱水通過自然對(duì)流在箱體內(nèi)循環(huán)流動(dòng)，熱量通過輻射傳遞到箱體內(nèi)部從而保持了溫度的恒定。獨(dú)特的水套式設(shè)計(jì)有其優(yōu)點(diǎn)：水是一種很好的絕熱物質(zhì)，當(dāng)遇到斷電的時(shí)候，水套式系統(tǒng)就能更可靠地長(zhǎng)久保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性（維持溫度恒定的時(shí)間是氣套式系統(tǒng)的4-5倍）。如果您的實(shí)驗(yàn)環(huán)境不太穩(wěn)定（如有用電限制，或者經(jīng)常停電）并需要保持長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件，此時(shí)，水套式設(shè)計(jì)的二氧化碳培養(yǎng)箱就是您最好的選擇。而氣套式加熱系統(tǒng)是通過箱體內(nèi)的加熱器直接對(duì)箱內(nèi)氣體進(jìn)行加熱的。

氣套式設(shè)計(jì)在箱門頻繁開關(guān)引起的溫度經(jīng)常性改變的情況下能夠迅速恢復(fù)箱體內(nèi)的溫度穩(wěn)定。因此，氣套式與水套式相比，具有加熱快，溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點(diǎn)，特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)的培養(yǎng)。此外，對(duì)于使用者來(lái)說氣套式設(shè)計(jì)比水套式更簡(jiǎn)單化（水套式需要對(duì)水箱進(jìn)行加水、清空和清洗，并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運(yùn)作的情況）。在購(gòu)買氣套式培養(yǎng)箱時(shí)，要注意的是：為了不影響培養(yǎng)，培養(yǎng)箱還應(yīng)該有一個(gè)風(fēng)扇以保證箱內(nèi)空氣的流通和循環(huán)，此裝置還有助于箱內(nèi)溫度、CO2和相對(duì)濕度的迅速恢復(fù)。

此外，有些類型的二氧化碳培養(yǎng)箱還具備外門及輔助加熱系統(tǒng)，這個(gè)系統(tǒng)能加熱內(nèi)門，提供給細(xì)胞良好的濕度環(huán)境，保證細(xì)胞滲透壓維持平衡，且可有效防止形成冷凝水以保持培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度和溫度。如果您的培養(yǎng)環(huán)境需要精確的控制，那么這個(gè)輔助系統(tǒng)則是必不可少的。

4、微處理控制因素：

每一個(gè)使用者都希望所用的儀器能夠方便好用，微處理控制系統(tǒng)和其它各種功能附件（如高溫自動(dòng)調(diào)節(jié)和警報(bào)裝置、CO2警報(bào)裝置、密碼保護(hù)設(shè)置、自動(dòng)校準(zhǔn)系統(tǒng)等等）的運(yùn)用，就使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和控制都非常的簡(jiǎn)便。微處理控制系統(tǒng)是維持培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度和CO2濃度穩(wěn)態(tài)的操作系統(tǒng)。例如PIC微處理器控制系統(tǒng)，它能嚴(yán)格控制氣體的濃度并將其損耗降至極低水平，以保證培養(yǎng)環(huán)境恒定不變，且能保證長(zhǎng)期培養(yǎng)過程中箱內(nèi)溫度精確，并有LED顯示，可設(shè)置、校正溫度和CO2濃度。不同的微處理系統(tǒng)雖然名字不相同，但是其原理與控制效果則無(wú)甚區(qū)別，選購(gòu)時(shí)不必太在意它們名字上的區(qū)別，關(guān)鍵是要自己覺得使用起來(lái)方便，容易操作，而且要能夠達(dá)到所需的控制精度。

5、污染物因素：

污染是導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗的一個(gè)主要因素，因而，二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們?cè)O(shè)計(jì)了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生，其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長(zhǎng)的區(qū)域和表面，并結(jié)合自動(dòng)排除污染裝置來(lái)有效防止污染的產(chǎn)生。例如，鑒于CO2培養(yǎng)箱在使用過程中有時(shí)會(huì)伴有霉菌生長(zhǎng)，為確保培養(yǎng)箱免受污染且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性，有些公司開發(fā)設(shè)計(jì)了帶有紫外清潔功能的增強(qiáng)型CO2培養(yǎng)箱；還有公司設(shè)計(jì)的特有銅外殼HEPA濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣，可過濾除去99.97%的0.3um以上的顆粒，并能有效殺死過濾時(shí)被擋在濾器內(nèi)的微生物顆粒；

此外，自動(dòng)殺菌裝置能使箱內(nèi)溫度達(dá)到90℃從而殺死污染微生物，當(dāng)它與HEPA系統(tǒng)結(jié)合使用就能夠極大的減少污染。這些裝置對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)說是必不可少，但選擇何種清潔裝置呢？當(dāng)然功能越多越好的最適用，但是價(jià)格也會(huì)隨之上升。如果經(jīng)費(fèi)有限，只能選擇一個(gè)價(jià)格較便宜的，這時(shí)就應(yīng)該配合使用一些消毒劑和除菌劑，經(jīng)常進(jìn)行消毒滅菌，也能達(dá)到貴儀器的效果，只是比較麻煩一點(diǎn)而已�？傊瑹o(wú)論選擇何種裝置，都要時(shí)刻注意保持培養(yǎng)箱的清潔，經(jīng)常清理箱體，這樣才能增加儀器的使用壽命，并使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，保證結(jié)果的可靠性。

二、在使用時(shí)應(yīng)該注意的事項(xiàng)

1.儀器應(yīng)放置在平整的地面上，環(huán)境應(yīng)清潔整齊，干燥通風(fēng)；

2.儀器使用前，各控制開關(guān)均應(yīng)處于非工作狀態(tài)，調(diào)速旋鈕應(yīng)置于最小位置；

3.不可將流入氣體壓力調(diào)至過大，以免沖破管道及損傷探測(cè)器；

4.關(guān)好培養(yǎng)箱的門，以免氣體外泄，影響試驗(yàn)效果；

5.每次停機(jī)前，各控制開關(guān)均應(yīng)處于非工作狀態(tài)才切斷電源；

6.保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈，并定期消毒；9.經(jīng)常注意箱內(nèi)蒸餾水槽中蒸餾水的量，以保持箱內(nèi)相對(duì)濕度，同時(shí)避免培養(yǎng)液蒸發(fā)；

7.不適用于含有易揮發(fā)性化學(xué)溶劑，低濃度爆炸氣體和低著火點(diǎn)氣體的物品以及有毒物品的培養(yǎng)。

8.正確地使用和注意儀器的保養(yǎng)，使其處于良好的工作狀態(tài)，可延長(zhǎng)儀器的使用壽命；

9.制冷系統(tǒng)停止工作后，用軟布擦凈工作腔和玻璃觀察窗；

10.儀器在連續(xù)工作期間，每三個(gè)月應(yīng)做一次定期檢查；檢查是否有水滴，污物等落入電機(jī)和外露的制冷元件上；清理壓縮機(jī)，冷凝器上的灰塵和污物；檢查保險(xiǎn)絲，控制元件及緊固螺釘；

11.儀器經(jīng)長(zhǎng)期使用，自然磨損屬正�，F(xiàn)象，應(yīng)聯(lián)系廠家進(jìn)行維修。